丙酮酸激酶缺乏症的治疗是怎样的 丙酮酸激酶缺乏症如何检查

一、关于丙酮酸激酶

　　丙酮酸激酶，别号丙酮酸磷酸转化酶、磷酸酶、丙酮酸激酶，它的分子式wiec9h9n，简称ATP：丙酮酸2-O-磷酸转移酶。在发酵系统中，它是催化二次磷酸化反响生成的酶。ec2.7.1.40。

　　能以磷酸烯醇(phosphoenolpyruv-ate)丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7.5kcal。除需求二价金属离子外(Mg2+和Mn2+)外，还需求一价金属离子(K+.Rb+，Cs+)，在生理上起效果的大概是K+。分子量约25万。是催化ADP为ATP的构成，成果是构成丙酮酸的终产品。

　　效果

　　丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP变为ATP和丙酮酸，是糖酵解进程中的首要限速酶之一，有M型和L型两种同工酶，M型又有M1及M2亚型。M1散布于心肌、骨骼肌和脑安排;M2散布于脑及肝脏等安排。L型同工酶首要存在于肝、肾及红细胞内。心肌细胞坏身后，PK开释入血，PK的测定可用于确诊心肌梗死。

　　正常值

　　血清(28.3±12.8)U/L(丙酮酸激酶法)。

　　临床意义

　　(1)急性心肌梗死

　　在急性心肌梗死发病2hPK活性开端添加，22h达顶峰~PK活动(为操控值的3倍)，天达第二顶峰(为操控值的4倍);48~72h后逐步康复正常。急性心肌梗死病人血清PK活性添加。

　　此外，因为急性心肌梗身后PK活性开端添加和康复正常均较早，因而可用于急性心肌梗死延展或再梗死确实诊。但有人以为PK不如CK灵敏，可是比CK特异，因为添加时刻时刻短，最佳辅之以别的监测目标;也有人以为PK是确诊急性心肌梗死的简洁、敏捷而牢靠的一项目标。

　　(2)宫颈癌

　　宫颈癌、淋巴肉瘤、髓性白血病和霍奇金氏病病人血清PK总活性显着增高。

　　(3)肌原性疾病

　　(假肥大型肌养分不良、Becker型肌养分不良、肢带型以及面肩肱型肌养分不良)的病人，其血清PK活性显着添加，达对照值的1～25倍，阳性率>90%。相反，在神经源性疾病(脊髓性肌萎缩、肌萎缩侧束硬变等)的病人，大大都人的血清PK活性正常。故测定血清PK活性关于区别肌源性或神经源性肌病有必定的价值。

　　(4)血液系统疾病

　　PK总活性显着降低，医治先天性非球形细胞性溶血性贫血。在别的血液病如急性白血病、红细胞(RBC)、白血病、再生妨碍性贫血贫血、阵发性夜间血红蛋白尿、贫血医治先天性开展是无效的，红细胞PK活功能够降低到50%的操控值。

二、丙酮酸激酶缺乏症的病因

　　(一)发病原因

　　1.生化变异型PK是一分子量为60kD由完全相同或基本相同的亚单位组成的四聚体，在哺乳动物组织中有4种异构酶：L，R，M1和M2，R型异构酶(R-PK)只存在于成熟的红细胞，R-PK用聚丙烯酰胺凝胶电泳后分成两种成分，Rl-PK为一同源四聚体(L2L2)，R1-PK主要存在于原始红细胞和网织红细胞，而R2-PK则主要存在于成熟红细胞，L-型PK存在肝脏，与R-PK非常相似但不完全相同，M1型存在于肌肉，心脏和脑，M2-PK存在于白细胞和血小板，幼稚细胞中也有M2-PK，在PK缺乏症的某些患者的红细胞已发现有M2-PK的存在，PK突变型的异质性可以解释PK缺乏表型的大范围变异性，“古典”的PK缺乏，除酶活性减低外其余酶的特性均无异常，起先认为仅只是结构正常的酶产生过少而已，但进一步研究证明存在有仅影响催化活性的酶分子结构改变，显然，大部分PK突变都伴有结构异常蛋白，而这些蛋白在电泳速度，残留活性，底物亲和度，动力学特征，热稳定度，核苷酸特异性，ATP抑制，变构激活或最适pH方面均不同。

　　2.遗传方式PK缺乏症为常染色体隐性遗传，但偶有呈常染色体显性遗传家系的报道，一般来说，只有纯合子或复合杂合子才会出现溶血性疾患，杂合子患者尽管红细胞中有葡萄糖中间产物改变，但无贫血表现，PK缺乏症杂合子的检出率为0.24%～2.20%，大部分PK缺乏症患者为复合杂合子，真正的纯合子很少。

　　3.分子生物学M2型PK基因定位于15q22-qter，L型和R型PK基因定位于1q21，L和R型为异构调节，由用两个组织特异性启动子的同一个基因所转录编码的L型和R型仅只在前2个外显子有差异;M1和M2也是由同一基因所编码，由于剪接的不同而产生两种分别翻译成这种PK的mRNA，最近，Kanno等克隆了人的R型PK基因的cDNA，由2060bp组成，编码1个574个氨基酸组成的蛋白，PK缺乏症是由于PK基因点突变，迄今已发现130余种不同的突变，主要为错义突变，小部分患者表现为缺失或插入。

　　(二)发病机制

　　PK缺乏患者的确切溶血机制现尚不清楚，PK缺乏时，ATP生成减少，ATP缺乏是PK缺乏症导致溶血的主要因素，因为ATP缺乏时，引起红细胞内K和水的丢失，红细胞皱缩成棘细胞，该细胞变形性降低而在脾中阻留，被破坏，导致镕血性贫血的发生，PK缺乏红细胞二磷酸腺苷(ADP)和氧化型辅酶Ⅰ(NAD)合成受损，ADP和NAD会加剧由于PK缺乏导致的葡萄糖代谢量的减低，由此而加重PK，缺乏患者的溶血，此外PK缺乏症红细胞中2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)积聚，而2，3-DPG是己糖激酶的抑制物，这样亦加剧PK缺乏引起的葡萄糖代谢量的减低，ATP生成量进一步减少使PK缺乏症患者的溶血加重。

三、丙酮酸激酶缺乏症的检查

　　1.外周血血红蛋白一般在50～60g/L以上，网织红细胞计数大多在2.5%～15.0%，切脾后可高达40%～70%，外周血中可以见到棘形红细胞和有核红细胞，自身溶血试验为非特异性的，现在不再用此试验作为对红细胞酶病的实验诊断手段，红细胞中糖酵解途径的某些中间产物有特征性改变，如2，3-DPG呈现2倍以上的升高，ATP减少，3-PG增高等。

　　2.PK底物活性测定方法有荧光斑点法，PK活性筛选试验和国际血液学标准化委员会推荐的Blume法PK活性定量测定，PK荧光点试验的原理是还原产生还原型辅酶Ⅰ(NADH)在紫外光下可以发出荧光，进行试验时，磷酸烯醇式丙酮酸，NADH和乳酸脱氢酶(LDH)同加在滤纸上的被检血液混合孵育后检测其荧光强度，如果血样PK缺乏，NADH就不被利用，丙酮酸就不会产生，荧光持续45～60min，正常血样，15min后荧光消失，输血后可导致假阳性，在应用PK荧光斑点试验时，首先应使该试验标准化，即用定量法校正筛选法的结果，这样的结果才比较可靠，PK活性定量测定是通过标准温度，pH和底物浓度下用分光光度计定量测定NADH转化成NAD的量来确定，在进行红细胞PK活性测定时，一定要尽可能地清除白细胞，因为白细胞中含有M1和M2型PK酶，白细胞中PK活性为正常红细胞的300倍，若检测样品中存在有白细胞则会导致假阳性，因此一般要求白细胞含量<1.5×109/L。

　　3.PK底物活性，甲糖-1，6-二磷酸激活及热稳定试验大部分有贫血表现的纯合子或复合杂合子其酶的活性水平为正常值的5%～40%，而临床正常的杂合子其酶活性约为正常的50%，对不明原因的非球形红细胞溶血性贫血病例，如果测出PK活性正常时，应进一步检查PK底物活性，甲糖-1，6-二磷酸激活及热稳定试验，则有可能发现异常。

　　根据临床表现，症状，体征可选择心电图，B超，X线等检查。

四、丙酮酸激酶缺乏症的治疗

　　1.输血在出生后前几年，严重贫血的最好处理是红细胞输注，血红蛋白浓度维持在80～100g/L以上不影响儿童生长和发育，并减少危及生命的再障危象。然而决定输血最重要的是根据病人对贫血的耐受性而非仅是血红蛋白的水平。由于患者红细胞2，3-DP*平增高，中重度贫血时可无明显不适。

　　2.脾切除脾切除治疗可使病人长时间地控制贫血。由于出生后前几年在无脾状态下有发生严重败血症的危险，故患者行脾切除术至少要5～10岁后。脾切除术可使预后改善，但并不能纠正溶血状态。在术前需要输血者，术后则可能不需要输注。较年轻儿童经过快速的造血生长“追赶”期，运动耐受性改善。尽管不能完全排除再障危象的发生的可能，但发生后常较轻。术后经过改善初期后，Hb可能逐渐降低。病人术后网红细胞数量增加时，说明不完全代偿性溶血过程持续存在。在选择病人行脾切除术时，红细胞生存期及脾脏血容量的术前评估意义不大，因为部分病人肝脏是红细胞破坏的主要场所，脾脏似乎破坏缺陷更严重的红细胞。总之，贫血越严重，则脾切除效果越好。

　　3.药物治疗在体外水杨酸盐反向影响PK缺陷性细胞的能量代谢，这种现象的临床意义一旦确定，则可以在严格的血液学监护下应用水杨酸盐。还观察到患严重PK缺乏症的女性病人应用口服避孕药时溶血增加。

　　4.异基因骨髓移植(Allo-BMT)或外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)或脐血移植PK缺乏症所致严重溶血性贫血患者，如需反复输血才能维持生命，Allo-BMT或Allo-PBSCT是惟一的根治手段。