荧光检查,荧光检查的方法

一、荧光检查的适应症及举例

　　适应症：在皮肤病中适用于细菌、病毒、衣原体、支原体等病原体感染的快速诊断。举例如下：

　　1、红斑狼疮是一种典型的自身免疫性结缔组织病，多见于15～40岁女性。红斑狼疮是一种疾病谱性疾病，可分为盘状红斑狼疮、亚急性皮肤型红斑狼疮、系统性红斑狼疮、深在性红斑狼疮、新生儿红斑狼疮、药物性红斑狼疮等亚型。荧光检查法可对其进行有效的诊断。

　　2、疱疹样皮炎是一种较为少见的慢性良性复发性大疱性皮肤病，病因不明。它的特点是反复发作、病程呈慢性经过、皮疹形态多样、对称分布、剧烈瘙痒、预后良好。多发生于22～55岁。常有无症状的谷胶过敏性肠病。荧光检查可对其进行快速的诊断。

　　3、 在妇科里，荧光检查 是将荧光物质进入生殖系统静脉血中，进行造影。简单地说荧光物质就是造影剂。 荧光检查可以提高妇科检查结果的准确性，有利于及时诊断病症，起到早治疗早康复的效果，更能进行宫颈癌和一些瘤变病症的早期筛查，保护妇女健康。

二、荧光检查的方法

   荧光检查的方法有以下三种：

   1、直接免疫荧光法。用以检查病人的皮肤组织中有无免疫球蛋白或补体沉积，用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上，由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合。使之呈现荧光，根据荧光分布和形态确定抗原部位和性质。此法用已知的抗体检查未知的抗原，但一种标记抗体只能查一种抗原，可直接采用病人的病变组织。如：红斑狼疮、疱疹样皮炎、类天疱疮等作冰冻切片，荧光染色。此法简单、特异。

　　采集标本后，直接涂于载玻片上，自然干燥后，丙酮固定10分钟，待丙酮完全挥发后，加30 l特异性的荧光素标记的抗体，室温湿盒内孵育30min，使标记的抗体与抗原发生特异性结合，取出后 蒸溜水冲洗去未结合的抗体，置荧光显微镜下观察。

　　2、间接免疫荧光法。用以检测病人血清中是否存在某种特异抗体或自身抗体，反应中的两对抗原抗体相对应的特异结合，而第二抗体(荧光抗体)则针对第一抗体的结合体，由于第一抗原分子可与若干个抗体分子结合，因而第二结合反应后，灵敏度大大提高。本法常用于各种自身抗体的检测。如：系统性红斑狼疮、硬皮病等。

　　标本采后，保存于转送培养基中，临用前混匀后取悬液涂片，固定后加入50 l用PH 7.2 PBS 1:16稀释的特异性抗体，35℃孵育30分钟，取出后用PH 9.0的0.01 M的磷酸盐缓冲液浸泡10分钟，干燥后用50 l 1:500稀释的荧光抗体(第二抗体)，35℃孵育30min，蒸溜水冲洗，干燥后甘油封固加盖玻片镜下观察。

　　3、补体结合法本法。是在间接法的基础上发展而成的，即在抗原抗体反应时，加入补体，再用荧光标记的抗补体抗体进行示踪。如：检测妊娠疱疹病人的自身抗体。

三、荧光检查法的使用器械

　 医用荧光棒是一种化学发光的照明光源，把医用荧光棒贴在阴道扩张器叶片内侧，作为进行阴荧光视诊的照明光源，用于妇科常规检查、宫颈癌及癌前病变的筛查，本产品为一次性使用产品，不与人体接触，无毒、无放射性。其注意事项如下：

　　1、医用荧光棒被折断并活化后的几分钟内，荧光光源最为明亮，如果荧光视诊未在15分钟最佳观察时间内完成，则需更换荧光检查棒;

　　2、用医用荧光检查棒检查有无出现醋酸白病变区，可重复用3-5%醋酸溶液涂抹于宫颈，以便帮助从黏液中区分醋酸白病变区域

　　3、有时荧光光源发出的光会发生宫颈反光，轻轻移动扩阴器，白色区域如果出现移动，那么就是荧光光源造成的反射光，或者用一个小棉球轻压醋酸白病变区，用这种方法改变宫颈的轮廓，这样可以帮助区别是荧光光源还是真正的醋酸白病变;

　　4、化学荧光视诊不用于醋酸白病变的分级;

　　5、医用荧光检查棒中的液体不可食用，且具有一定黏附性，出现漏液，请勿使用，并清洗双手;严禁弄破医用荧光棒，以免棒内液体泄漏。

　　6、医用荧光棒不污染衣物，可放心使用。

四、荧光检查的护理要点

　 荧光检查法是利用荧光素具有荧光特性,作为造影剂快速进入静脉内,随血流进入脉络膜,视网膜血管,借助眼底连续照像,动态观察,记录眼底血管的微细结构,观察其病理生理改变,是诊断眼底疾病的重要方法之一.现将该检查的护理要点报告如下：

　　1、造影检查前,仔细询问有无高血压,心脏病,哮喘,肝肾功能障碍及药物过敏史.如血压≥180/90mmHg需降压治疗,符合要求后方能造影,过敏体质者慎用.家属要在眼底荧光血管造影预约单上详细填写并签字,护士要详细向病人及家属交待造影过程中可能出现的副作用。

　　2、首先要做好病人的心理护理,向病人介绍说明此检查的过程,静脉用药的原理及造影的意义,说明做好眼球配合的重要性.解除病人的思想顾虑,取得病人的配合。

　　3、常用复方托品酰胺滴患眼3~4次,每次按压泪囊部2~3min,以免吸收中毒,观察瞳孔散大情况。

　　4、医务人员应做到亲切和蔼,使病人心身放松,再次询问过敏史,取肘正中静脉,穿刺后,缓慢推注0.1%荧光素钠稀释液5ml,观察20~30min患者无异常不适,按体重15~20mg/kg,再取20%荧光素钠,待医生将镜头对准瞳孔后,计时,快速推注,严密观察病人反应。

　　5、多例患者在快速推药后刻出现一过性恶心,眩晕,偶有呕吐,嘱病人深呼吸放松,可逐渐缓解.少数患者发生荨麻疹,一般不须处理,可自行消退.严重可发生哮喘,肺水肿,过敏性休克,应立即皮下注射0.1%肾上腺素,按过敏性休克抢救处理.造影室常规备好肾上腺素,氟美松,非那根,阿拉明等抢救药品和抢救器械,以防万一。