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酸碱性蛋白的显示实验和步骤

2018-06-04 来源:网友投稿 作者:蒋紫翠

  酸性蛋白是以酸性氨基酸成分为主的蛋白质,碱性蛋白是以碱性氨基酸成分为主的蛋白质。细胞核由碱性蛋白和少量酸性蛋白组成,细胞质中主要含有酸性蛋白。我们用三氯醋酸抽提掉核酸后,通过使用不同ph值的快绿染液染色,可以使细胞内酸碱性蛋白清晰显示出来。

  准备好器材、试剂和材料等实验用品。准备好水浴锅、染色缸、盖玻片和注射器等器材以及70%乙醇溶液、5%三氯醋酸溶液、100ml蒸馏水、Ph2.2酸性蛋白染色液(由0.2%快绿和等量75mol/L HCL溶液混合而成)和ph8碱性蛋白染色液(由0.2%快绿和等量0.005%Na2CO3溶液混合而成)等试剂,同时再准备好蟾蜍血涂片。

  准备好实验用品之后就要开始蟾蜍取血了。用捣髓法先处死蟾蜍,再用解剖针捣毁其脑组织和脊髓,致使蟾蜍四肢松软且呼吸消失。处死蟾蜍之后,将它的腹面向上放入蜡盘中,展开胸腔并打开心包。在心脏剪一小口取一滴心脏血滴在干净的载玻片一端,用另一拨片以30到45度角度匀速向前推片,不要停顿且动作要快,以免血液凝固。重复这种方法制备第二张血涂片,室温自然晾干后固定。

  酸碱性蛋白的显示,是需要按照一定的步骤来进行的。首先将新鲜血涂片自然晾干并放入70%乙醇溶液中固定十分钟,接着取出血涂片晾干并放入70到90 °C5%三氯醋酸溶液15到20分钟,然后在冷5%三氯醋酸溶液中漂洗再用蒸馏水洗三次每次五分钟,之后分别插入酸性蛋白染色液和碱性蛋白染色液中并分别染色15分钟和45分钟,取出血涂片用蒸馏水洗并风干,最后用二甲苯透明两分钟并用树胶封片,酸碱性蛋白的显示结果就会清晰呈现。

  为了顺利完成酸碱性蛋白显示的实验,我们首先应当准备好水溶锅、染色缸、载玻片、注射器、乙醇溶液、三氯醋酸溶液、快绿、蒸馏水、酸性蛋白染色液和碱性蛋白染色液等器材和试剂。之后,从蟾蜍心脏取血并制成血涂片。按照一定的实验步骤,酸碱性蛋白的显示结果就会清晰呈现出来了。